紫外可見分光光度法的定量分析基礎(chǔ)說明

紫外可見分光光度計是基于紫外可見分光光度法原理，利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。

 

紫外可見分光光度法的定量分析基礎(chǔ)是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比，其數(shù)學(xué)表示式如下：

 A=錬c

式中：A—吸光度(又稱光密度、消光值)，

å—摩爾吸光系數(shù)(其物理意義為：當(dāng)吸光物質(zhì)濃度為1摩爾/升，吸收池厚為1厘米，以一定波長原光通過時，所引起的吸光值A(chǔ))，b—吸收介質(zhì)的厚度(厘米)，c—吸光物質(zhì)的 濃度(摩爾/升)。

物質(zhì)的顏色和它的電子結(jié)構(gòu)有密切的關(guān)系，當(dāng)輻射(光子)引起電子躍遷使分子(或離子)從基 態(tài)上升到激發(fā)態(tài)時，分子(或離子)就會在可見區(qū)或紫外呈現(xiàn)吸光，顏色的發(fā)生或變化是和分 子的正常電子結(jié)構(gòu)的變形聯(lián)系的。當(dāng)分子中含有一個或更多的生色基因(即具有不飽和鍵的 原子基團(tuán))，輻射就會引起分子中電子能量的改變。常見的生色團(tuán)有：

CO， -N=N-， -N=O，-C N，CS

如果兩個生色團(tuán)之間隔一個碳原子，則形成共軛基團(tuán)，會使吸收帶移向較長的波長處(即紅 移)，且吸收帶的強(qiáng)度顯著增加。當(dāng)分子中含有助色基團(tuán)(有未共用電子對的基團(tuán))時，也會 產(chǎn)生紅移效應(yīng)。常見的助色基團(tuán)有：-OH -NH2， -SH， -Cl, -Br, -I